G试验作为侵袭性真菌病拟诊病例的标志

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G试验作为侵袭性真菌病拟诊病例的标志

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侵袭性真菌病(invasive fungal disease, IFD),又称侵袭性真菌感染,是指真菌侵入人体组织、血液,并在其中生长繁殖导致组织损害、器官功能障碍和炎症反应的病理改变及病理生理过程。

近年来随着广谱抗生素、糖皮质激素、免疫抑制剂、抗肿瘤药物的使用增多,器官移植、各种导管和插管技术的开展以及艾滋病患者的增多,由条件致病性真菌引起的真菌感染发病率正在增长,尤其在免疫低下病人身上。侵袭性真菌病在恶性血液病和艾滋病人群体内非常普遍,并且院内感染(尤其是器官移植接受者和其它接受免疫抑制疗法的病人)的的发病率一直呈上升趋势。

真菌病是由真菌引起的疾病的统称。很多真菌病是由于吸入真菌孢子获得的,这些孢子是源于土壤、植物碎屑、空气处理系统和/或暴露表面。某些条件致病性真菌存在于人的皮肤表面/内部、肠道和粘膜。侵袭性真菌病的诊断诊断标准由危险因素、临床特征、微生物学检查和组织病理学检查4部分组成。根据真菌感染的可能性将诊断结果分为三个级别: 确诊、拟诊和疑似。G试验可作为侵袭性真菌病拟诊病例的标志。

条件致病性真菌,包括念珠菌属、曲霉菌属、镰孢菌属、毛孢子菌属、酿酒酵母、支顶孢属、粗球孢子菌、荚膜组织胞浆菌、申克孢子丝菌和耶氏肺孢子虫。由它们和另外一些微生物产生的(1→3)-β-D-葡聚糖可以用G试验检测出来。

为什么要开展G试验

正常人血浆的(1→3)-β-D-葡聚糖含量很低,通常低于100pg/mL,推断是由于消化道存在酵母共生体。大多数的致病真菌的细胞壁中存在(1→3)-β-D-葡聚糖,微量的(1→3)-β-D-葡聚糖会在生命过程中进入循环系统。检测部分IFD病人的血清或血浆,会发现(1→3)-β-D-葡聚糖的含量明显高于非感染人群。监测血浆(1→3)-β-D-葡聚糖水平升高和不断上升的迹象能提示疾病的发展和预后。葡聚糖水平高于150pg/mL的高危病人作为阳性。因为真菌病具有动态病程,反复测试(通常每周2-3次)可以提高灵敏度。已证明确诊IFD患者血浆(1→3)-β-D-葡聚糖水平会出现持续升高,且会随着有效治疗下降及转阴,而药物治疗非感染人群血浆(1→3)-β-D-葡聚糖水平无明显变化。

主要的深度真菌病是由念珠菌、曲霉菌、隐球菌、毛霉菌和丝孢酵母菌引起的。最常见的是念珠菌病和曲霉菌病。隐球菌病和接合菌病(包括毛霉菌病)相对较少见。G试验无法检测特定真菌品种。例如隐球菌属,其产生的(1→3)-β-D-葡聚糖很少;本试验亦无法检测接合菌,比如犁头霉属、毛霉属和根霉属,它们均未表明会产生(1→3)-β-D-葡聚糖。侵入形态的皮炎芽生菌产生的(1→3)-β-D-葡聚糖非常少并已证实不会产生阳性血浆葡聚糖的值。

G试验的优点: - 更快的IFD诊断支持
- 检测时间短
- 可检测大部分的深部真菌感染:念珠菌病、曲霉菌病

G试剂反应的特异性

用于G试验的检测试剂来自于鲎的阿米巴细胞溶胞物,含有丝氨酸蛋白酶原(C因子)、G因子。其中,C因子能被革兰氏阴性菌脂多糖激活,G因子能被(1→3)-β-D-葡聚糖激活,引起一些列酶促反应。也就是说普通的G试剂有两条反应途径,均能使G试验出现阳性结果,无法区分真菌感染与细菌感染。

特异性G试剂由于截断了C因子的反应途径,因此能特异的与(1→3)-β-D-葡聚糖反应。

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